CRISPR-Cas9 基因组编辑技术为 T 细胞的基因工程改造提供了新途径。短引导 RNA(gRNA)与 Cas9 核酸酶形成的核糖核蛋白(RNP)能够在基因组的特定位置产生双链断裂(DSBs),这些断裂可通过易错的非同源末端连接(NHEJ)敲除基因,或通过同源定向修复(HDR ...
Cas9蛋白为热稳定S.pyogenes来源的核酸酶(又称为spCas9)。此RNP体系不需要自行构建gRNA表达载体,无需在病毒级实验室中操作,无DNA组分,并且可实现多个crRNA指导下的多靶点编辑,大大简化前期实验步骤。该即用型的RNP体系适合化学转染(借助蛋白转染试剂 ...
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