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研究团队通过单分子追踪技术(AuRBT)首次捕捉到动态过程:SpRY 在靶点处反复尝试解旋却频频失败,而野生型 Cas9 则“一气呵成”。这种“卡壳”现象源于其过强的初始结合力,导致能量屏障升高。
Oligo-LiveFISH 利用通过计算设计、体外(in vitro )转录和化学标记生成的荧光引导 RNA(gRNA)寡核苷酸池,以核糖核蛋白形式递送。 利用机器学习,研究人员表征了 gRNA 设计和染色质特征对成像效率的影响。多色 Oligo-LiveFISH 在 3D 中实现了 20nm 的空间分辨率和 50ms ...
CRISPR文库筛选技术是一种高通量功能基因组学方法,通过设计靶向不同基因的向导RNA(gRNA),结合CRISPR-Cas9系统实现精准基因编辑,从而系统性解析基因功能。该技术目前已在疾病机制研究和药物靶点筛选等领域发挥重要作用。 《Nucleic Acids Research》2025年2月刊载 ...
MCDA 预扩增以样本提取的 DNA 为模板,引物结合目标区域,Bst 8.0 DNA 聚合酶扩增产生含 PAM 位点的大量 MCDA 扩增产物。CRISPR/Cas12b gRNA 系统与扩增产物特异性结合,激活反式切割活性,切割标记生物素和猝灭剂的 ssDNA 探针。整个检测过程包括 DNA 模板提取(25 分钟 ...
目前,该系统主要采用两种策略:一种是通过外源表达携带ADAR脱氨结构域的蛋白及相应的引导RNA(gRNA)实现目标RNA的编辑;另一种则利用单一gRNA ...